Immunoassay-Entwicklung für die optische Bestimmung von humaner Pankreas-Lipase und dem Arzneistoff Amitriptylin
Dissertation der Mathematisch-Naturwissenschaftlichen Fakultät der Eberhard Karls Universität Tübingen.
Katrin Krieg
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In den vergangenen Jahren haben immunoanalytische Nachweise bei Biosensoren zunehmend an Bedeutung gewonnen. Auf Grund der hohen Spezifität von Antikörpern können niedrige Nachweisgrenzen erreicht und der Analyt auch in komplexen Matrices (etwa Nahrungsmittel und Blut) nachgewiesen werden. Diese Arbeit beschäftigt sich mit der Entwicklung neuer heterogener Immunoassays zur Bestimmung von humaner Pankreas-Lipase für die Bauchspeicheldrüsen-Diagnostik und des Psychopharmakons Amitriptylin (AMT) für Therapeutisches-Drug-Monitoring. Da sich die beiden nachzuweisenden Analyte grundlegend voneinander unterscheiden werden für beide Assays die Oberflächenchemie, die Regenerationslösung sowie die Assay-Prozedur individuell angepasst. Die Konzentrationsbestimmung erfolgt unter Verwendung der optischen Messmethoden RIfS (markierungsfrei) und TIRF (Fluoreszenzmarkierung). Untersucht wird auch die Inter- und Intra-Transducer-Reproduzierbarkeit sowie die Langzeitstabilität der Sensorbeschichtung. Für das kleine Molekül AMT wird außerdem die Kreuzreaktivität des Antikörpers gegenüber strukturverwandten Arzneistoffen getestet. Dadurch ist es möglich, die Summe mehrerer trizyklischer Antidepressiva zu bestimmen.
