Neuartige Methode des ELISpot Assays unter Verwendung von

Neuartige Methode des ELISpot Assays unter Verwendung von von Straub,  Alexander Johannes
Inhaltlicher Schwerpunkt dieser Forschungsarbeit ist das hier zum ersten Mal beschriebene, multifunktionelle "CHic-bare" und "Click-bare" Copolymersystem, welches die Grundlage zur Generierung oberflächengebundener Hydrogele auf (polymeren) Trägermaterialien (z.B. Mikrotiterplatten) bildet. Die photoaktiven Monomerbausteine der Copolymere können während UV-Belichtung über C,H-Insertionsreaktionen ("CHic") abreagieren, was zur Netzwerkbildung und kovalenten Oberflächenanbindung führt. Bei Verwendung einer Photomaske kann eine Mikrostrukturierung der proteinabweisenden Hydrogel-Beschichtung erreicht werden. Die Azid-Monomerbausteine können mit einem geeigneten Reaktionspartner (z.B. ein Alkin-modifiziertes Protein) über Azid-Alkin-Cycloadditions(AAC)-Reaktionen ("Click"-Reaktionen) reagieren, wodurch eine spezifische Funktionalisierung der Beschichtung möglich ist. Die maßgeschneiderten Hydrogel-Beschichtungen in Mikrotiterplatten, welche eine vergleichbar hohe Biotin-Bindungskapazität besitzen, können zur effizienten Vereinzelung von Polystyrol-Modellpartikeln und Zellen verwendet werden. Es konnte gezeigt werden, dass die auf derartigen Beschichtungen durchgeführten ELISpot-Assays (Enzyme-Linked Immunospot Assays) eine höhere Empfindlichkeit besitzen und dass die resultierenden ELISpot-Flecken eindeutig zuordenbar sind. Ausblickend ist dargestellt, dass die Copolymere aufgrund ihrer modularen Chemie durch nasschemische und/oder photochemische Modifizierung für weitere Oberflächenanwendungen von Interesse sind. Somit eröffnet die Kombination der universellen "CHic"-Reaktion mit der sehr effizienten "Click"-Reaktion völlig neue Wege für Oberflächenanwendungen im Bereich der Materialwissenschaften.
Aktualisiert: 2021-12-30
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